設(shè)計更好的T細胞

       在用作臨床治療之前，CAR-T細胞是在實驗室里研制的。從患者身上分離出來原代人T細胞，進行激活、擴增和遺傳修飾，以表達體外識別所選抗原的CARs。在這個階段，有許多因素需要加以考慮，其中包括靶點選擇和遺傳修飾的方法。

1、靶點選擇

       CARs是合成的跨膜受體，其含有賦予抗原特異性的抗體的胞外scFv結(jié)構(gòu)域，和一種細胞內(nèi)組分，這種細胞內(nèi)組分通常包括CD3ζ和協(xié)同刺激（比如CD28、4-1BB、OX-40）信號域，以模擬T細胞信號（圖1）。在抗原識別后，CAR-T細胞被激活并啟動它們的效應(yīng)子功能，比如細胞因子的產(chǎn)生和細胞毒性，其最終導(dǎo)致任何表達靶點抗原細胞的消除。由于腫瘤抗原通常也在非惡性細胞上表達，因此，靶點選擇在CAR-T細胞設(shè)計是一項挑戰(zhàn)。

       最基本的CAR-T細胞能靶向單一的腫瘤特異性抗原從而用于血癌治療。比如靶向在B細胞淋巴瘤和淋巴細胞白血病上表達的CD19的工程化T細胞，以及靶向在急性髓系白血病（AML）和其他血液系統(tǒng)惡性腫瘤上過度表達的CD123（IL3RA）的工程化T細胞。

2、遺傳修飾

     通過對T細胞遺傳修飾表達CAR，其被重新定向至一特定的靶點。最常用的遺傳修飾T細胞的方法是使用病毒（比如γ-逆轉(zhuǎn)錄病毒或慢病毒）的載體，這些工程化載體可以攜帶CAR構(gòu)建體。簡言之，T細胞被激活，然后用可將其攜帶的物質(zhì)釋放進細胞的病毒顆粒進行轉(zhuǎn)導(dǎo)，從而導(dǎo)致CAR構(gòu)建體插入轉(zhuǎn)導(dǎo)的T細胞基因組里（圖2）。

3、新概念

      CAR-T細胞設(shè)計的前沿研究中不斷有各種令人興奮的新概念提出。特別令人感興趣的是遞送：如何有效地將T細胞遞送到腫瘤中，以及工程化的T細胞能夠在體內(nèi)傳送些什么物質(zhì)給腫瘤。
       這些新的概念可以改進治療效果，但有些也可能增加治療成本。由于T細胞療法已經(jīng)成本過高，因此需要進行各項臨床試驗來確定將這些新概念從實驗室應(yīng)用到臨床是否有意義。